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根皮素(CAS60-82-2)对照品提取物提取方法

时间:2017-11-20   浏览次数:  分享到:
1.根皮素(60-82-2)作为多酚的一种.是出色的天然抗氧化剂,可以预防骨质硫松、肿瘤疾病、心血管硬化以及老年痴呆症等戊多种常见疾病,还可降血脂、减肥。无毒性,可直接加工成胶囊或作为添加剂加人到普通食品中。
有文献报道了不同溶剂、沮度、时间、料液比对苹果中多酚提取效果的影响阅,但没有关于根皮素提取优化的报道。有文献报道使用乙酸乙醛萃取苹果.并利用反相高效液相色语测定含最.但未检出根皮素。尽管有个别文献也测定出根皮素.但提取方法不适合根皮素的提取.反映不出样品中根皮素的真实含量。本文利用食用苹果的副产品一苹果皮.提出一条高提取率的根皮素的提取工艺路线。
根皮素提取物苹果
2.1技术路线
新鲜苹果一取苹果皮在研钵中碾碎,用70%乙醉水溶液匀浆,浸提法(加热回流法、做波法、索氏提取法)提取,抽滤一旋转蒸发,盐酸沸水浴,乙醚萃取,旋转蒸发、正丁醉萃取一旋转燕发,甲醇溶解,液相色谱测定。
 
2.2色谱条件
利用光电二极管阵列检测器,可以获得吸光度
(A )、波长(λ)和时间(t)三维空间色谱图。在200nm-400nm。波长范围得到根皮素的紫外吸收光谱图,根皮素的最大吸收波长为286nm,并与标准样品对照,进行纯度检验。
 
2.3苹果皮样品的制取
分别取4份新鲜苹果皮25g,在室温下于研钵中剪碎,加人适量石英沙辅助碾碎。用70%的乙醇水溶液与碾碎的苹果皮混合,按2.4方法进行根皮素的提取。
根皮素提取
2.4根皮素的粗提
2.4.1浸提法
    取40 mL 70%的乙醉水溶液与碾碎的苹果皮混合于IOOmL烧杯中,室温搅拌1h,溶液开始为黄色,提取结束后略显红色。提取液减压抽滤.滤液用流动相定容至50 mL,用液相色潜检侧。
2.4.2微波法
    取40 mL 70%的乙醉水溶液与碾碎的苹果皮混合于100 mL烧杯中,在微波炉中提取I min,提取液少量蒸发。提取液显示为黄色。待其冷却后减压抽建,滤液用流动相定容至50 mL容盆瓶中,用液相色潜检测。
2.4.3加热回流法
取40 mL 70%的乙醉水溶液与碾碎的苹果皮混合于100 mL烧杯中,在90℃水浴锅中回流I h,静置至室温。回流法提取液直接抽滤困难,先分批在离心机上离心,再减压抽滤,滤液用流动相定容至50 mL,用液相色谱检测。
2.4.4索氏提取法
取100 mL 70%的乙醉水溶液与碾碎的苹果皮混合,在索氏提取仪中提取根皮素2h。旋转蒸发仪上燕去部分乙醉,水浴温度为65℃。静置至室温.减压抽撼,滤液用流动相定容至50 mL,用液相色谱检测。
 
2.5根皮素的精提
    将根皮素的祖提取液转人旋转蒸发仪中,在70℃的水浴上浓缩。在所得浆状物中,加入8 mL6%盐酸,溶液呈现红色。沸水浴上水解3h,溶液逐渐变为紫黑色,并出现沉淀。冷却后.用50 mL乙醚萃取,上层乙醚萃取液呈现黄色,下层溶液为紫黑色并含有沉淀,静置10min。
    将乙醚萃取液转人旋转蒸发仪,30℃水浴上蒸去乙醚。残留物用10 mL蒸馏水溶解,用50 mL正丁醉充分萃取。上层正丁醉萃取液为黄色,下层水层呈现白色乳浊液,有小块片状透明不溶物吸附在分液漏斗壁上。
    将正丁醇萃取液转人旋转蒸发仪.70℃的水浴上蒸发,待提取液蒸发至残留10 mL左右时.将其例在蒸发皿上,70℃水浴上蒸去剩余的正丁醇。
2.6根皮素精提取液的检测
    在表面皿上滴3 mL去离子水、2 mL甲醉,使其溶解并移人离心管中.在离心机中以3 000 r/min离心3 min,清液用流动相定容至5 mL.用液相色谱检测根皮素含量。

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